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稳定同位素示踪法在动物发育和肌肉生长方面的应用

稳定同位素示踪法目前在许多领域都得到广泛应用,今天小编和大家分享同位素

示踪法在动物发育和肌肉生长方面的应用


过去研究和测定家畜动物的蛋白质合成和肌肉生长是利用原始的称重法,简便易行但比较粗放,但是结果误差较大。随着科学技术的发展,要求结果更精确,更科学,称重法就显得不太适用。


如今,常用的方法是同位素示踪法,包括放射性和非放射性两种。放射性同位素虽然较早的得到商业生产和应用,但是由于其放射性从而造成对人体、动物及环境的污染等诸多限制,放射性同位素的应用越来越不受欢迎而呈现下降趋势。从上世纪中期以来开始流行的非放射性(稳定)同位素技术由于其安全可靠而受到人们的青睐。


通常用于测定肌肉生长的稳定示踪剂包括由碳13氮15或氘标记的氨基酸,将其通过饲喂、静脉注射或腹膜腔注射,然后定期采集肌肉样品来测定该示踪剂在肌肉中的丰度(即进入肌肉的示踪剂的量),从而计算得到肌肉蛋白的合成速率或增长率。由于质谱仪测定的高精度甚至超高精度,其结果准确可靠。而且可以同时测定任何组织,比如在同一次试验中可以测定不同部位的骨骼肌、心肌、肝脏等各个组织器官的蛋白质合成。试验也可以是存活试验,只需要在被测试动物肌肉组织采集极小量的样品(毫克级)即足够供仪器测试所用。


随着稳定同位素技术的不断发展提高,示踪剂投放以及样品的测定越来越先进、简便和可靠。比如可以用经济易用的重水(D2O 或 2H2O) 作为示踪剂。因为蛋白质合成时需要结合水分子,所以重水中的氘原子便进入新合成的蛋白质。通过对肌肉蛋白质中氘的丰度和体液中氘的丰度的比较,就可以计算得到该组织的蛋白质合成速率或肌肉增长率。


另外,示踪剂的投放途径可以根据情况和需要改变,抑或是静脉恒速灌流,或者是一次性腹膜腔内大剂量注射(也叫洪水式投放),都可以通过利用相应的数学处理来得到正确的结果。下图是一组仔猪试验结果,通过腹膜腔注射一大剂量氘标记的苯丙氨酸后其血浆丰度随时间的变化曲线。从途中可以看到,15分钟以后血浆苯丙氨酸示踪剂丰度进入平台期,所以在此期间可以采集组织样品,测试组织蛋白中氘苯丙氨酸的丰度,从而计算得到该蛋白质的合成速度:

       蛋白质合成速率, % = 组织蛋白质中氘-苯丙氨酸丰度  ÷ 血浆氘-苯丙氨酸丰度 x 100% 


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